骨質疏松癥是最常見的骨骼疾病之一杨箭，嚴重影響老年人的健康和生活質量舔糖。成骨細胞分化和骨形成的減少導致骨量和微結構的變化，使骨骼容易發(fā)生骨折奥邮。佛手柑素（BM）是一種來自各種柑橘類水果的天然化合物划提，具有多種生物活性枫弟，包括抗脂肪生成的功能。
2022年1月30日鹏往，發(fā)表于Food &Function的一篇題為Bergamottin promotes osteoblast differentiation and bone formationvia activating the Wnt/β-catenin signaling pathway 的文章證明BM作為成骨的正向調節(jié)劑淡诗，能顯著促進成骨細胞的分化和骨形成。在機制上伊履，BM激活了Wnt/β-catenin信號通路韩容，促進了β-catenin的核轉位。此外唐瀑，BM極大地提高了β-catenin的表達群凶，增強了T細胞因子7（TCF7）的轉錄激活，并增加了Runt相關轉錄因子2（Runx2）的表達哄辣∏肷遥總之，這項研究表明柔滔，BM能增強成骨細胞的分化溢陪，減弱卵巢切除術（OVX）引起的骨質流失萍虽，有可能被開發(fā)成預防骨質疏松癥的食品成分或補充劑睛廊。
實驗過程中，研究人員使用英格恩DNA轉染試劑H4000做了細胞的轉染實驗杉编，英格恩H4000用量方法和lipo2000一樣超全，轉染效率更高，價格減半邓馒，重要的是嘶朱，可以用含血清的培養(yǎng)基轉染，不用在有血清和無血清之間更換光酣，增加工作量疏遏，同時有血清轉染不僅不造成細胞毒性，而且由于血清的存在，有利于細胞的狀態(tài)維護财异，提高轉染效率倘零。
通過大量實驗，研究人員最終得出以下結論：
1.????BM增加成骨基因的表達戳寸，促進成骨細胞的分化
科研人員用不同濃度的BM處理MC3T3-E1細胞呈驶，研究BM對成骨細胞的細胞毒性。結果顯示疫鹊，BM在低于100μM的濃度下對MC3T3-E1細胞沒有明顯的細胞毒性袖瞻。ALP活性檢測顯示，BM以劑量依賴的方式增強了ALP活性拆吆。接觸BM后聋迎，包括Alp、Col-1锈拨、Runx2和Ocn在內的成骨標記基因的mRNA水平明顯增加砌庄，尤其是在20μM的劑量下。此外奕枢，BM處理后娄昆，成骨細胞的ALP染色強度和基質礦化也得到明顯的促進。這些結果表明缝彬，BM促進了成骨細胞的分化萌焰，增加了成骨基因的表達。
2. BM調節(jié)Wnt/β-catenin信號通路中的關鍵蛋白表達
Wnt/β-catenin信號通路在成骨細胞分化中起著關鍵作用谷浅。實驗數(shù)據(jù)表明扒俯，BM通過增加LRP6、Wnt3a和β-catenin的表達以及減少GSK-3β的表達一疯，在Wnt/β-catenin途徑的調節(jié)中發(fā)揮了重要作用撼玄。
3. BM促使β-catenin核轉位并激活下游的信號轉導
首先未巫，與對照組相比兜辞，在BM（20μM）存在的情況下桐猬，發(fā)現(xiàn)β-catenin（用紅色染色）在細胞核中明顯增加绅这。此外追城，用20μM的BM處理后郭计，β-catenin在細胞核中的表達明顯上調霞揉，而在細胞質中的表達則沒有明顯改變有额。在BM（20μM）處理組中竹海，TCF7的轉錄活性急劇增強慕蔚。此外，經(jīng)BM處理后斋配，TCF4孔飒、TCF7和Runx2的表達增加灌闺，特別是在20μM時。這些結果表明坏瞄，BM激活了成骨細胞中的Wnt/β-catenin信號菩鲜，這可能與它對成骨細胞分化的積極調節(jié)密切相關。
4. BM恢復了過氧化氫（H2O2）誘導的成骨細胞分化的抑制作用
H2O2可以通過引發(fā)氧化應激來抑制成骨細胞的分化惦积，從而誘發(fā)細胞衰老接校。這里研究人員進一步評估了BM對H2O2誘導的細胞衰老導致的成骨細胞分化減弱的影響。實驗數(shù)據(jù)表明狮崩，BM以劑量依賴的方式改善了H2O2誘導的細胞衰老對成骨細胞分化的抑制蛛勉。
5. BM對OVX誘導的骨質流失有保護作用
采用OVX誘導的骨質疏松癥小鼠模型，進一步研究BM對體內骨質疏松癥的治療效果睦柴。結果表明诽凌，BM可以成為治療骨質疏松癥的一種有前途的治療劑。
總之坦敌，本研究闡明了BM通過激活Wnt/β-catenin信號通路促進成骨細胞分化侣诵，恢復成骨細胞的分化功能，并抑制OVX引起的骨質流失狱窘。這些發(fā)現(xiàn)證明杜顺，BM有可能被開發(fā)成治療骨質疏松癥的食品成分或食品補充劑。
