"T"代表"transient"梳毙,是經(jīng)過特殊改良以增強其進行瞬時轉(zhuǎn)染能力的HEK 293細胞油挥,這些細胞通常在短時間內(nèi)表達基因或蛋白質(zhì)而不將其整合到細胞基因組中腺毫。
- 引入T-antigen基因: T-antigen基因通常通過轉(zhuǎn)染技術(shù)被引入HEK 293細胞瘾英。這可能涉及將T-antigen基因包含在表達載體(如質(zhì)粒)中橙依,并通過轉(zhuǎn)染劑或其他方法將其引入細胞內(nèi)证舟。
- 選擇性壓力: 引入T-antigen的細胞在培養(yǎng)基中添加選擇性抗生素(如G418)等硕旗,使得只有表達T-antigen的細胞能夠存活下來。這種選擇性壓力確保了細胞系中存在T-antigen的表達女责。
- T-antigen的表達: 成功引入T-antigen的細胞開始表達T-antigen蛋白漆枚。T-antigen對細胞周期的調(diào)控和DNA復(fù)制有重要作用,因此它的存在可以增強外源DNA的復(fù)制和表達抵知。
- 建立穩(wěn)定的細胞系: 經(jīng)過選擇和表達T-antigen的細胞可以被進一步培養(yǎng)并建立成為穩(wěn)定的細胞系墙基,即HEK 293T細胞系。
通過引入T-antigen刷喜,HEK 293T細胞被賦予了更高的DNA復(fù)制和表達能力残制,從而增加了瞬時轉(zhuǎn)染效率。這使得可以更容易地將外源基因引入細胞中掖疮,進行瞬時表達實驗初茶,例如在蛋白質(zhì)表達和功能研究中。