B淋巴細胞是腫瘤免疫研究中的熱點，在實體腫瘤中發(fā)現(xiàn)由B細胞浸潤的三級淋巴結(jié)構(gòu)（Tertiary lymphoid structures涯曲，TLS）和抗腫瘤免疫激活及免疫治療響應(yīng)等緊密相關(guān)。前期研究發(fā)現(xiàn) TLS與肺腺癌免疫檢查點阻斷治療應(yīng)答相關(guān)在塔，但TLS提高患者免疫治療療效背后的機制仍不明確。
2023年4月12日拨黔，弗朗西斯·克里克研究所的研究團隊在?Nature?上發(fā)表題為?Antibodies against endogenous retroviruses promote lung cancer immunotherapy?的文章蛔溃，通過單細胞轉(zhuǎn)錄組技術(shù)，研究了來自TRACERx421（通過治療追蹤非小細胞肺癌進化）等肺癌隊列的患者以及肺腺癌小鼠模型中的B細胞反應(yīng)篱蝇。該研究發(fā)現(xiàn)在人和小鼠肺腺癌均引起了生發(fā)中心反應(yīng)贺待，存在可與腫瘤結(jié)合的抗體，并通過實驗將內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒（Endogenous retrovirus零截，簡稱ERV）包膜糖蛋白確定為主要的抗腫瘤抗體靶點麸塞。CXCL13和免疫檢查點阻斷（Immune checkpoint blockade，ICB）治療具有協(xié)同作用涧衙， ICB治療可增強抗逆轉(zhuǎn)錄病毒抗體反應(yīng)哪工。
01?肺腺癌模型中的B細胞反應(yīng)
在該研究中，研究人員基于KPAR細胞（源自Trp53fl/flKrasLSL-G12D/+小鼠）構(gòu)建了小鼠肺腺癌（Lung adenocarcinoma 弧哎，LUAD）模型雁比，免疫熒光染色結(jié)果顯示B220+B細胞主要在KPAR小鼠肺腫瘤周圍，成熟的TLS表現(xiàn)為花生凝集素（Peanut agglutinin;PNA）陽性撤嫩，和活躍的生發(fā)中心（Germinal center偎捎，GC）反應(yīng)表現(xiàn)一致。流式分析結(jié)果表明B220+GL7+CD95+GC B細胞和TCRβ+CD4+PD-1+CXCR5+TFH細胞比例顯著升高序攘，而KPB6小鼠肺腫瘤中GC B和TFH細胞未發(fā)生明顯變化茴她。綜上所述，KPAR腫瘤能刺激TLS形成和生發(fā)中心反應(yīng)程奠，而KPB6腫瘤不能丈牢。
02?抗腫瘤抗體靶向ERV
前期發(fā)現(xiàn)KPAR小鼠的血清中含有與KPAR結(jié)合的抗體，為了進一步探究KPAR結(jié)合抗體的潛在抗腫瘤活性梦染，將KPAR小鼠的血清轉(zhuǎn)移到二次KPAR移植的受體小鼠中赡麦，生存分析結(jié)果表明受體小鼠的生存期顯著延長。
接下來為了探究KPAR小鼠中抗腫瘤抗體的特異性帕识，首先選擇兩類細胞表面抗原進行研究泛粹，一類是內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒（Endogenous retrovirus，簡稱ERV）肮疗，其中包括內(nèi)源性鼠白血病病毒（Murine leukemia virus晶姊，簡稱MLV）包膜糖蛋白，相比KPB6伪货，ERV在KPAR中的表達水平更高们衙。另一類是人工分離的傳染性MLV钾怔，命名為KPAR相關(guān)逆轉(zhuǎn)錄病毒（KARV）。研究人員用一種能與逆轉(zhuǎn)錄病毒相互作用的內(nèi)源性MLV包膜的特異性抗體83A25孵育KPAR細胞宗侦，結(jié)果發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性MLV包膜糖蛋白發(fā)生內(nèi)化馋袜，因此將KARV確定為主要的抗體靶標男旗。
03?PD-L1阻斷增強了抗ERV反應(yīng)
研究人員進一步探索了GC反應(yīng)和抗腫瘤抗體是否有助于免疫檢查點阻斷治療欣鳖，如PD-1或PD-L1阻斷治療察皇。結(jié)果表明和同型對照相比，接受抗PD-L1免疫治療的模型小鼠脾臟的GC B細胞泽台、TFH及暗區(qū)的GC B細胞均顯著增加师痕。PD-L1阻斷可顯著延長小鼠的生存期，顯著增加了與腫瘤結(jié)合的IgG和IgA類抗體的滴度，同時PD-L1阻斷增加了抗體與KPAR細胞結(jié)合的親和力商佑。體內(nèi)驗證試驗結(jié)果表明，與同型對照相比抓半，供體小鼠的PD-L1阻斷進一步延長了二次移植受體的生存期狡孔。
04?CXCL13與ICB治療具有協(xié)同作用
為了探討抗腫瘤B細胞反應(yīng)是否有助于其它治療如靶向治療的效果植旧，研究人員選取了高選擇性的KRAS G12C突變抑制劑G12Ci（Adagrasib，MRTX849）咕别，發(fā)現(xiàn)G12Ci促進抗腫瘤反應(yīng)偿短，而另一種絲裂原細胞外激酶（mitogen-activated extracellular signal regulated kinase欣孤，MEK）抑制劑MEKi（曲美替尼）則阻礙抗腫瘤B細胞反應(yīng)笔链。???
為了進一步表征TLS和抗腫瘤B細胞反應(yīng)在治療中的貢獻古话，對CXCL13進行表征發(fā)現(xiàn)CXCL13阻斷減少了抗PD-L1治療的KPAR小鼠模型的GC B細胞反應(yīng)雏吭，進一步檢驗其治療效果，將脂質(zhì)體GL67作為CXCL13的載體經(jīng)鼻給藥治療KPAR小鼠陪踩，發(fā)現(xiàn)與空載體相比杖们，這種治療不僅增加了GC B細胞的反應(yīng)，且顯著延長了小鼠的生存期肩狂。研究人員還探究了CXCL13和抗PD-L1治療與單一療法對生存期的影響摘完，發(fā)現(xiàn)和單一療法相比，聯(lián)合治療組的生存期延長傻谁。
05?ICB治療可增強人體抗ERV抗體的作用
對TRACERx隊列進行表征發(fā)現(xiàn)孝治，B細胞markers高表達和良好的預(yù)后相關(guān)，CXCL13高表達和預(yù)后改善相關(guān)审磁。使用流式細胞術(shù)篩選患者樣本中與ERV包膜糖蛋白反應(yīng)的抗體谈飒，發(fā)現(xiàn)接近一半LUAD患者可檢測到和HERV-K（HML-2）包膜蛋白反應(yīng)的抗體。通過抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒性作用（ADCC）檢測發(fā)現(xiàn)态蒂，添加可溶性重組ERVK-7包膜糖蛋白可抑制約55%由具有HERV-K(HML-2) 包膜反應(yīng)性抗體的血漿介導(dǎo)的ADCC杭措。HERV-K(HML-2)包膜反應(yīng)性抗體在LUAD抗腫瘤反應(yīng)中占比較大。對ICB治療隊列進行表征發(fā)現(xiàn)钾恢，ICB治療后手素，全部患者的HERV-K(HML-2) 包膜反應(yīng)性抗體滴度均升高。綜上所述赘那，ERVK-7高表達及HERV-K(HML-2) 包膜靶向抗體應(yīng)答與抗腫瘤免疫有關(guān)刑桑，可能通過抗腫瘤免疫來增加ICB的療效。
結(jié)論和意義
總的來說募舟，該研究通過對小鼠肺腺癌的全面表征發(fā)現(xiàn)人和小鼠肺腺癌引發(fā)了生發(fā)中心反應(yīng)祠斧，存在可與腫瘤結(jié)合的抗體，并將ERV包膜糖蛋白確定為主要的抗腫瘤抗體靶點拱礁，且ICB治療可增強抗逆轉(zhuǎn)錄病毒抗體反應(yīng)琢锋。該文章為 TLS 與免疫治療反應(yīng)關(guān)聯(lián)機制的研究提供了參考，對于新療法的開發(fā)具有重要意義呢灶。
參考文獻：
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