細胞培養(yǎng)中的傳代數(shù)(passage number)是記錄該細胞被傳代的次數(shù)瘤载,即收取并重新分散到多個“子”細胞培養(yǎng)瓶中。
當細胞被胰酶消化卖擅、凍存鸣奔,隨后解凍并重新復蘇時墨技,這個過程為一代。因此挎狸,將細胞轉(zhuǎn)移到另一個培養(yǎng)瓶扣汪,在重新播種時應增加其傳代數(shù),但在凍存時不要增加傳代數(shù)锨匆。
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細胞代數(shù)定義
細胞代數(shù)通常是指細胞傳代的次數(shù)崭别,常規(guī)定義是細胞用胰酶消化一次,細胞代數(shù)就增加一代恐锣。細胞代數(shù)不能代表細胞的倍增次數(shù)茅主。
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細胞分類
正常細胞通常只能分裂有限的次數(shù),隨后就會喪失增殖的能力土榴,這是一個由遺傳決定的事件诀姚,被稱為衰老;這種細胞系被稱為有限細胞系(例如:原代細胞玷禽、干細胞)赫段。但是,一些細胞系會通過被稱為轉(zhuǎn)化的過程變?yōu)橛郎约毎德垩埽@一過程可自然發(fā)生(例如:病變)瑞佩,也可經(jīng)化學或病毒誘導發(fā)生。有限細胞系發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得無限分裂能力后坯台,就成為無限細胞系(例如:腫瘤細胞和永生化細胞)炬丸。
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有限細胞系
對于有限細胞來說,細胞的代數(shù)計算通常是需要精確計數(shù)蜒蕾。有限細胞系在培養(yǎng)得當?shù)那闆r下最多只能傳15-20代稠炬,而且細胞狀態(tài)會隨著細胞代數(shù)的增加而明顯變差,所以在培養(yǎng)和設計實驗時需要先考慮獲取的有限細胞系的細胞量是否能夠滿足實驗的需要量咪啡,從而盡可能的選擇代數(shù)靠前的細胞完成實驗首启。
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無限細胞系
對于無限細胞系來說,細胞的代數(shù)計算通常是不精確的撤摸。例如人類歷史上最久且最常用的細胞HeLa細胞系毅桃,HeLa細胞系來自海瑞塔·拉克斯女士的宮頸癌細胞,在1951年進行細胞取樣后准夷,培育至今钥飞,已有71年之久,按照時間推算的話已經(jīng)繁殖超過12000代了衫嵌,但是大部分實驗室為了方便記錄都是從獲取細胞后開始算代數(shù)读宙。對于無限細胞系而言,其特點就是可以連續(xù)傳代楔绞,細胞狀態(tài)基本不會因為代數(shù)增加而出現(xiàn)明顯變化结闸,所以在培養(yǎng)無限細胞系時唇兑,不用太過于關注細胞代數(shù),而是需要關注細胞狀態(tài)桦锄,只要細胞生長旺盛扎附,沒有污染,那就可以用于實驗研究察纯。
PS:有限細胞隨細胞代數(shù)增長而狀態(tài)變差是正常的帕棉,但是無限細胞狀態(tài)變差不一定是細胞代數(shù)增長導致的,更多是培養(yǎng)方法饼记、方式香伴。
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細胞代數(shù)只能參考
傳代數(shù)沒有考慮細胞的播種密度或隨后收獲的細胞數(shù)量,因此無法給出種群數(shù)量翻倍的實際數(shù)字具则。例如即纲,一個人可以將代次為10的細胞按1:4進行傳代,而另一個可以按1:10的比例傳代相同的細胞博肋。兩者在新的培養(yǎng)瓶都標上相同的代次數(shù)低斋,即11。然而匪凡,分裂率較高的細胞將經(jīng)歷更多輪的細胞分裂膊畴,它們與初始細胞間隔了很多代。
沒有直接的實驗來確定細胞培養(yǎng)的傳代數(shù)或PD數(shù)病游。因此唇跨,每次傳代都必須有適當?shù)挠涗?/p>