1一般常用的固定液有:14%多聚甲醛惯吕、10%中性福爾馬林惕它、糖原固定液( Carnoy固定液)、植物固定液(FAA)废登,Bouin 液(脂肪淹魄、胰腺專用), FAS眼球固定液堡距。
2浸泡固定甲锡;最常見的固定方式, 就是直接將樣品放入裝有固定液的容器中羽戒,浸泡(48h)缤沦。
3.新鮮取材、新鮮固定易稠。言外之意就是取材要迅速缸废,固定要及時。否則組織在活體動物體內(nèi)的溫度一般情況下高于室溫 ,會在離體后因溫度差的原因迅速失水企量,造成不可逆的損傷测萎。
4.廣口寬底。容器的瓶口孔徑不可以小于組織大小届巩,在固定之前的組織器官是軟的,固定之后器官變硬硅瞧,無法從小瓶口中取出。另外恕汇, 底部不平,類似EP管那種尖底很容易限制住組織的活動腕唧,導(dǎo)致貼壁,貼壁部位接觸不到固定液;會造成局部固定不良拇勃,影響后面的實驗四苇。
5.組織最佳固定時間是48h,最好不要超過7天即脫水包埋做成蠟塊儲存方咆,可以很好的保證組織形態(tài)和抗原活性, 10年以上月腋。如果當(dāng)時沒有辦法處理,盡可能以每三天換一次新固定液的方式置于4度冰箱內(nèi)儲存瓣赂,最長不超過14天榆骚。
6.剖開固定,盡可能減少單位需要固定的組織體積煌集,同樣可以達到體積比符合要求的狀況妓肢。
7.先用生理鹽水或其他腸道沖洗專用平衡鹽溶液沖洗出腸內(nèi)食物殘渣等內(nèi)容物,再用固定液將生理鹽水置換出來苫纤, 最大限度的保證腸腔的管腔結(jié)構(gòu)充盈碉钠, 腸內(nèi)絨毛迅速充分接觸到固定液。
8.用紗布包起來組織后用回形針等重物將樣品墜到液面以下卷拘, 讓樣品充分浸泡在固定液中喊废。用棉球?qū)⑵靠谏隙硕伦∫彩沁@個原理,但是棉花的滲透效率沒有紗布好栗弟。
10.CE污筷、EP管固定是咱們?nèi)粘I钪薪訕硬豢赡鼙苊獾牡俏覀円信袛嗄芰Γ褪沁@個組織一定要足夠小乍赫,原則就是可以在底部自由晃動瓣蛀,液體一定要灌滿,在快遞運輸途中雷厂,特別容易大頭朝下惋增,組織剛好貼在蓋上離液體干燥的現(xiàn)象。