實驗方法
1.取一定的植物葉片組織,用液氮研磨成粉末裝槐秧,加入65℃預(yù)熱的TPS DNA 提取液600ul,充分混勻忧设。
2.65℃水浴30min,期間顛倒混勻3-4次颠通。
3.加入氯仿/異戊醇/乙醇(體積比為 400:20:80)址晕,混合搖勻。4℃ 12000 rpm 離心10min顿锰,轉(zhuǎn)移上清至新的離心管中谨垃。(這一步可以忽略不進行,如果是想蛋白去除的干凈一些硼控,可以進行)
4.加入等體積的異丙醇刘陶,顛倒混勻,-20℃放置10 min牢撼。4℃ 12000 rpm 離心10 min匙隔,棄上清。
5.加70%乙醇500ul洗滌沉淀熏版。4℃ 12000 rpm 低速離心5 min纷责,棄上清,超凈臺吹干沉淀撼短,加入30ulddH2O溶解DNA再膳。
6.置于-20℃,保存曲横。
TPS提取液配方(100ml)
1M Tris-HCl 10ml
0.5M EDTA 2ml
5M KCl 50ml
ddH2O 38ml