10X單細胞免疫圖譜分析匯總

作者闰非,Evil Genius~~

新的一周膘格,天氣變冷了,大家努力科研工作的同時财松,注意保暖瘪贱,畢竟身體是革命的本錢。

相比較單細胞轉錄組辆毡,ATAC和VDJ的文章相對較少菜秦,當然了,分析起來也沒有單細胞轉錄組那么容易舶掖,所以就導致了一般大家做單細胞都是3端轉錄組球昨,ATAC和VDJ一般不考慮,不考慮不代表不重要眨攘,只是ATAC和VDJ需要更深的研究背景主慰,更強的科研和分析能力嚣州。說起這方面,不得不說國外的研究者比國內(nèi)要專業(yè)的多共螺。

好了该肴,這一篇我們來匯總一下單細胞VDJ的分析,希望大家不要非在單細胞3端轉錄組上卷藐不,畢竟ATAC和VDJ做的人不多匀哄,路比較寬,稍微走一走雏蛮,就會達到事半功倍的效果涎嚼,如果非要在單細胞轉錄組上卷,那付出的努力要更多才行挑秉,而且往往是事倍功半法梯。

當然免疫相關的分析我也專業(yè)性不強,這也從側面說明了VDJ分析的巨大潛力和研究價值衷模,希望大家能在寬松的賽道上飛奔鹊汛,而不是在單細胞轉錄組賽道上堵車。腫瘤細胞通過基因突變產(chǎn)生新抗原(Neoantigen)阱冶,新抗原通過MHC分子呈現(xiàn)在細胞表面刁憋,隨后被T細胞識別。新抗原具有很強的免疫原性木蹬,因為它們只存在于腫瘤中至耻,而不存在于正常組織中。然而镊叁,大多數(shù)新抗原是獨一無二的尘颓,患者之間存在差異,因此新抗原疫苗需要作為個性化疫苗專門為每個患者生產(chǎn)晦譬,這也限制了其臨床應用疤苹。

文章Single-cell profiles reveal distinctive immune response in atopic dermatitis in contrast to psoriasis
雜志:Allergy
時間:2022年9月
樣本類型: skin and pbmc
取樣策略:不同條件下的皮膚樣本和pbmc樣本(兩組皮膚病,輕型和重型分別取樣)


分析策略:兩組病人(PS and AD)敛腌,血液樣本和皮膚樣本分開整合注釋(所以不要一味的做整合分析)卧土。

TCR分析策略:克隆豐度及組織部位之間的共享克隆(注意這里比較了相同細胞類型的TCR分布差異,不同病人及不同組織部位之間的差異像樊,體現(xiàn)不同病人尤莺、不同組織部位之間的免疫特征)

文章A CMV-induced adaptive human Vδ1+ γδ T cell clone recognizes HLA-DR
雜志:Journal of experimental medicine
時間:2022年9月
樣本類型: pbmc(individuals or HSCT patients)
VDJ分析策略:VDJ單基因豐度分析(這個主要是不同條件下計算出來的VDJ差異基因)、差異VDJ豐度的組合變化


識別出豐度變化的VDJ基因的配體序列(這個需要實驗驗證了)
Identification of HLA-DR as a ligand for TCR04 and TCR05

識別出VDJ的配體之后生棍,就可以分析HLA-DR激活的VDJ序列組成
Requirements for γδ TCR activation by HLA-DR

總之一句話颤霎,先分析VDJ單基因的差異,然后對V、D友酱、J分析到的豐度變化的基因看是否是VDJ組合晴音,通過這種組合推斷上有的配體(這一步最難),進而指導臨床應用粹污。

文章Midkine expression by stem-like tumor cells drives persistence to mTOR inhibition and an immune-suppressive microenvironment段多,這篇文章希望大家認真讀一讀。
雜志:Nature Communications
時間:2022年8月
樣本類型:angiomyolipoma tumor and normal
VDJ分析策略:細胞亞型之間的克隆相關性及分化軌跡(主要查看腫瘤組織內(nèi)的 T-cell clonal expansion)

文章scRNA-seq of gastric tumor shows complex intercellular interaction with an alternative T cell exhaustion trajectory
雜志:Nature Communications
時間:2022年8月
樣本類型: gastric tumor 壮吩、臨近tumor的組織,pbmc

取樣策略及基礎注釋

VDJ分析策略:VDJ豐度加缘,VDJ共享序列分析鸭叙,VDJ序列與軌跡分析相結合分析變化(克隆遷移)

文章TDO2+ myofibroblasts mediate immune suppression in malignant transformation of squamous cell carcinoma
雜志:Journal of Clinical Investigation
時間:2022年7月
樣本類型: 鱗狀細胞癌
取樣策略:


VDJ分析策略:克隆豐度的變化,尤其是在演化過程中的變化

文章Integrated transcriptome and trajectory analysis of cutaneous T-cell lymphoma identifies putative precancer populations
時間:2022年8月
雜志:Blood Advances
分析策略:


VDJ分析策略:首先豐度分析

細胞演化過程的VDJ豐度變化

文章Single‐cell transcriptomic atlas reveals distinct immunological responses between COVID‐19 vaccine and natural SARS‐CoV‐2 infection
時間:Jul 2022
雜志:Journal of Medical Virology
樣本類型:pbmc(新冠)
基礎分析策略 + 基礎注釋


VDJ分析策略:BCR和VDJ序列組合的變化

文章Single-Cell Sequencing Reveals Trajectory of Tumor-Infiltrating Lymphocyte States in Pancreatic Cancer
時間:Jul 2022
雜志:Cancer Discovery
樣本類型:Pancreatic ductal adenocarcinoma(normal 和 tumor)
基礎分析策略:


VDJ分析策略:軌跡分析 + VDJ豐度變化



文章Integration of tumor extrinsic and intrinsic features associates with immunotherapy response in non-small cell lung cancer
時間:Nature Communications
雜志:2022年7月
樣本類型:non-small cell lung cancer
VDJ分析策略:克隆類型的擴增分析


文章Single-cell immunoprofiling after immunotherapy for allergic rhinitis reveals functional suppression of pathogenic TH2 cells and clonal conversion
時間:2022年6月
雜志:Journal of Allergy and Clinical Immunology
樣本類型:Allergic rhinitis
VDJ分析策略:不同反應病人的VDJ主要序列的變化



同時也伴隨著軌跡分析過程中克隆擴增的變化

好了拣宏,更多的文章就留給大家自己總結了沈贝,我們來總結一下VDJ分析近期文章的主要思路:

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