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體外評價模型中使用的抗原提呈細(xì)胞主要有骨髓來源樹突狀細(xì)胞( bone marrow-derived dendriticcells惭笑，BMDC) 亚情、鼠樹突狀細(xì)胞系( 如JAWSII) 问顷、鼠淋巴瘤細(xì)胞系( 如RAW-S) 和人淋巴母細(xì)胞系( 如T2) ，效應(yīng)細(xì)胞主要有脾細(xì)胞秉继、外周血單核細(xì)胞( peripheralblood mononuclear cell，PBMC) 和TILs坟募，其中評價TILs 的數(shù)量和質(zhì)量越來越受到重視枯饿，靶細(xì)胞主要為各類腫瘤細(xì)胞; 實驗常用的T 細(xì)胞抗原特異性標(biāo)志物為HLA-抗原四聚體，效應(yīng)標(biāo)志物為IFN-γ闹炉、穿孔素蒿赢、顆粒酶B、TNF-α 和細(xì)胞因子( 如IL-2渣触， IL-4诉植， IL-6， IL-10 和IL-17α) 昵观，這些標(biāo)志物的檢測方法主要包括流式細(xì)胞術(shù)晾腔、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實驗( enzyme-linkedimmunospot assay，ELISPOT) 和酶聯(lián)免疫吸附實驗( enzyme-linked immunosorbent assay啊犬，ELISA) 灼擂。
常用的殺傷效果標(biāo)志物為51 Cr( 如51 Cr 釋放實驗) 、熒光素酶( 如熒光素酶細(xì)胞毒實驗) 和caspase 3 /7 ( 如caspase 3 /7 活化凋亡實驗) 觉至。
體內(nèi)評價實驗主要使用小鼠( 如C57BL /6剔应，BALB /c，DBA/2 和B6D2F1) 建立免疫反應(yīng)模型语御、免疫預(yù)防性或免疫治療性移植瘤模型峻贮，藥效指標(biāo)主要包括血清特異性抗體、不同組織( 血液/脾/腫瘤) 中抗原特異性CD+8 T 細(xì)胞应闯、腫瘤體積或質(zhì)量纤控、腫瘤轉(zhuǎn)移數(shù)和動物生存時間。
目前碉纺，研究人員針對黑色素瘤( B16F10) 船万、結(jié)腸癌( MC-38 和CT26 ) 刻撒、卵巢癌( ID8-G7 ) 、胰腺癌( Panc02) 耿导、淋巴細(xì)胞白血病( L1210) 声怔、乳腺癌( 4T1)和骨髓瘤( 5TGM1) 多種腫瘤進(jìn)行了個體化治療性疫苗的臨床前藥效學(xué)研究。
詳見 中國新藥雜志 2020年 第29卷第21期
OT-1小鼠由于被轉(zhuǎn)入Tcra-V2 (Vα2) 和Tcrb-V5 (Vβ5) 兩個基因舱呻，其CD8+ T細(xì)胞的TCR只能夠識別OVA的257-264肽段(SIINFEKL)醋火，是單克隆的淋巴細(xì)胞。也正是因為OT-1小鼠的CD8+ T細(xì)胞只能識別OVA而無法識別其他的抗原箱吕，所以這些小鼠的免疫系統(tǒng)都是缺陷的胎撇。
H-2Kb–SIINFEKL tetramer才是鑒別OT-1小鼠最好的指標(biāo)。
https://mp.weixin.qq.com/s?src=3×tamp=1657767846&ver=1&signature=oyqCnbCdP5Xim59h8MaWe2U90k7jsY-YfEYFqiKZ-8O70o2RQHy*1ctjRhxaYMJtw2u1p9GOgtkcybNToZOIDwd18h67LJiZJDtxCnaeDhC5frsssaWMZMdKdbbJUeXZMwp0go3ev2QiqYSOWLRlPhlL60xop63NwYfv6oS3z58=
可表達(dá)半乳糖苷酶的CD8+T細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系B3Z細(xì)胞
T Cell T cell hybridoma expressing a TCR that specifically recognizes OVA(257–264) (SIINFEKL) in the context of H-2Kb. The cells carry a beta-galactosidase (lacZ) construct driven by NF-AT elements from the interleukin 2 promoter
CXCL10 release has been recently considered as a new ICD marker, high expresion is good to immune.
T cell surface expression of activation marker CD69
effector molecules IFNγ and Gzm B on T cells
tumor vasculature reflected by CD31 staining
Batf3?/? mice that were deficient in type I conventional DCs
